饲料用纤维素酶活力检测方法汇总，长见识了

2023-01-04 | 新闻资讯 作者：小编

  

纤维素酶主要在饲料添加剂检测中较为常见。由于纤维素酶在饲料生产中，主要的作用就是将纤维素转化成葡萄糖和其他可溶性糖，从而改善饲料的营养价值，提高饲料利用率，进而提高禽畜的生产性能。纤维酶素活力定量分析是该类产品中标志性的检测项目。最近国家发布了全新的纤维素酶国家强制执行标准 GB 7300.403-2022《饲料添加剂 第4部分：酶制剂 纤维素酶》 ，为了方便大家新标准对该指标的规定，我们今天围绕纤维酶素活力检测相关知识探讨一下。


 纤维素酶

 

一、指标检测要求

新国标GB 7300.403-2022中明确提出了原标准对指标中的纤维素酶活力要求偏低，而提高产品酶活力，可以有效缩小各产品之间的质量差异， 有利于下游用户使用效果的保证。本来国标委提议是调整到 10000 以上， 因为饲料添加剂的活性值偏低， 配制饲料的效果会受影响。不过在实际生产经营及应用中， 为了适应市场及客户的需要， 企业会推出酶活低于 500 U/g 的产品。 所以国标委考虑到纤维素酶的多样性，不同来源的酶在动物饲料中应用的剂量和效果差异大等多种因素，将产品中纤维素酶活力限定为不得低于 500 U/g 或 500 U/mL。

 

二、检测方法

 

饲料用纤维素酶活力的检测方法主要有滤纸法、分光光度法纤维、二糖酶(B-葡萄糖酶)酶活法、内切葡聚糖酶酶活力测定法、外切葡聚糖酶酶活力测定法等，具体可供参考的检测方法标准如下：

 

 GB/T 23881-2009         饲用纤维素酶活性的测定 滤纸法

 GB/T 35808-2018         林业生物质原料分析方法 纤维素酶活性测定

 NB/T 13005-2016         用于生物燃料乙醇制备的纤维素酶酶活力测定方法

 NY/T 912-2020         饲料添加剂 纤维素酶活力的测定 分光光度法        

 

由于目前，饲用纤维素酶主要生产厂家酶活测定大部分都采用分光光度法，所以，标准中要求的也是主要采用 NY/T 912—2020 的方法进行测定。

 

三、测定原理

纤维素酶在一定温度与 pH 条件下， 水解纤维素分子中糖苷键， 生产纤维素寡糖、 纤维二糖和葡萄糖， 在碱性条件下， 3, 5-二硝基水杨酸与还原糖发生氧化-还原反应， 生产 3-氨基-5-硝基水杨酸。 其产生物在煮沸条件下 ， 其颜色深浅与还原糖含量成正比， 可用分光光度法测定。 根据吸光度计算其酶活力

 

四、样品制备

液体酶样： 准确吸取样品 10. 0ml 于 100ml 容量瓶中， 用适宜溶剂（蒸馏水或者缓冲溶液） 定容至刻度。 控制稀释样品酶活力在 100u/ml—1000 u/ml 范围内。

固体酶样： 准确称取样品 4. 0g， 精确至 0. 0002g。 用适量适宜溶剂（蒸馏水或者缓冲溶液）溶解后， 定容至 100ml。 再将定容溶液用定性滤纸过滤后， 准确吸取 10. 0ml， 用相应溶剂定容至100ml。 控制稀释样品酶活力在 100u/ml—1000 u/ml 范围内

 

以上便是纤维素酶活力检测方法汇总知识。至于分光光度法的具体检测步骤较为复杂，篇幅限制 在此我们就不详细阐述了。除了纤维素酶活力指标，GB 7300.403-2022贵的纤维素酶其他检测指标还有水分、pH值、铅、汞、镉、 总砷、大肠菌群、沙门氏菌、黄曲霉毒素 B 1、玉米赤霉烯酮等。由于是国家强制性标准执行，所以为了保证饲料添加剂纤维素酶产品质量和市场规范，新标准规定半年后才正式实施。为纤维素酶产品技术改造、成本投入、旧产品逐步退出市场也预留了过渡时间。

 


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